【鸡马立克氏病病毒的实验室诊断 乌鲁木齐师范大学温泉校区怎么样】从病鸡和许多外表正常的鸡体中都不难分离出病毒株 。供分离病毒用的首选样品是肿瘤细胞、肾细胞以及脾或周围血液的白细胞 。由于mdv在这些组织中是高度细胞结合性的 ， 所以必须用全细胞作为接种物 。羽毛囊是从病鸡中分离完整病毒粒子的唯一良好来源 。被怀疑含有mdv的样品 ， 可以用接种易感鸡、细胞培养物和鸡胚的方法来分离病毒 。
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雏鸡接种法：这是分离mdv最敏感的方法 。选择易感鸡 ， 在1日龄或l周龄内用腹腔接种的途径进行感染 ， 然后严格隔离饲养观察 。接种后经18 -21天 ， 对试验鸡连同相应的阳性和阴性对照 ， 进行有无感染迹象的检查 。试验应至少持续10周 。
细胞培养法：这种方法的敏感性虽不如雏鸡接种法 ， 但简单易行 ， 仍很有实用价值 。首先要制备鸭胚成纤维细胞或鸡肾细胞的培养物 ， 最适宜的接种物是白细胞、肿瘤细胞或血液 。5 - 14天出现典型的mdv蚀斑 ， 而对照培养物中不见这种变化 ， 这就是分离到mdv的证据 。这种特征性的蚀斑 ， 由圆形和梭形的折光性细胞和含有cowdrva型核内包涵体的多核细胞所组成 。
鸡胚接种法：通过卵黄囊或绒毛尿囊膜途径接种病毒的鸡胚 ， 分别于接种后4-6天或10-11天在绒毛尿囊膜上产生痘样病斑 。
在实验室诊断中 ， md的血清学试验通常用琼脂凝胶免疫扩散试验 ， 检测mdv抗原及其沉淀抗体 。用荧光抗体法或酶抗体法检查病鸡组织中的病毒抗原、肿瘤细胞上的肿瘤相关性表面抗原(matsa) ， 也可检测血清抗体 。用已知md阳性血清作琼扩试验检查羽毛囊抗原 ， 操作十分简便 。从被检鸡身上拔下几根含羽髓的羽毛 ， 剪下含羽髓的部分放入小青瓶内 ， 用玻璃棒进行适当挤压浸提后 ， 即可用于试验 。此法敏感性高 ， 人工感染mdv的鸡 ， 在接种20天后 ， 羽髓抗原阳性率可达90%以上 。用已知mdv抗原作琼扩试验检测血清抗体的方法 ， 可用于来免疫发病的诊断 ， 也可用于流行病学调查 。
病毒中和试验( vn)或蚀斑减少试验可用于检测感染鸡血清的中和抗体 。
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