鸡蛋怎么去蛋白质( 三 )


###其它资料参考###一、实验目的与原理
鸡卵粘蛋白存在于鸡蛋清中,对胰蛋白酶有强烈的抑制作用,高纯度的鸡卵粘蛋白抑制胰蛋白酶的分子酶的分子比为1:1.鸡卵粘蛋白在中性或酸性溶液中对热和高浓度的脲都是相当稳定的,而在碱性溶液中较不稳定.
由于鸡卵粘蛋白对胰蛋白酶有强烈的抑制作用,因此可以用鸡卵粘蛋白做亲和配基配制纯化胰酶的亲和材料.
二、材料与试剂:
1.材料:新鲜鸡蛋2只
2:仪器:抽滤瓶500-1000ml、烧结漏斗、移液器、磁力搅拌器
3:试剂:
10%TCA,用固体NaOH调调PH至1.05-1.10,需要50ml、5N HCL、5N NaOH、冷丙酮、胰蛋白酶液、BAEE-0.05M,PH8.0Tris-HCL缓冲液(每ml含0.34BAEE和2.22mgCaCL2),50ml
pH8.0,0.1M Tris-HCL缓冲液
三、操作步骤
1,取两只新鲜鸡蛋,得蛋清50ml,置于烧杯中,外用温水浴25℃-30℃,在不断搅拌条件下,缓慢加入等体积得三氯乙酸-丙酮(1:2V/V),立即出现大量白色絮状沉淀,加完后最终PH约3.5,再继续搅拌30min,然后在4℃冰箱中放置过夜.
2,次日用布氏漏斗抽滤,得黄绿色清液.
3,边搅拌边加入4℃预冷的丙酮200ml沉淀蛋白,在4℃放置2h之后将上清液小心倒入瓶中回收,下部沉淀部分于4000rpm离心5min,收集沉淀.
4,将沉淀溶于10ml无离子水中,对无离子水(50倍)透析4h,换水两次,再对碳酸钠缓冲液透析过夜,4000rpm离心10min ,去除不溶物.
###其它资料参考###1、准备一个小碗 , 逐个打到小碗里(预防散黄的蛋,散黄蛋弃不用),再小心地倒进大碗里
2、洗干净手 , 用手捞蛋黄,每次可以捞一个、两个 , 手指留缝,蛋白就流下去了,然后把蛋黄放到另外的一个碗里面 。这个方法可以很快分开二三十个鸡蛋没问题 。快而安全 。
3、如果只要分一个鸡蛋,那么把鸡蛋磕两半,把蛋黄在两个鸡蛋壳之间倒腾,蛋清就顺着留到下去 , 留下一个光秃秃的蛋黄在鸡蛋壳里面 。
4、把鸡蛋打倒碗里,再用筷子或者勺子控制住蛋黄 , 注意,要轻了点压住蛋黄,碗一倾斜一下 , 就可以把蛋清和黄分离 。
5、可用纸卷成1个漏斗,漏斗口下放1只杯子或碗 , 把蛋打开倒进纸漏斗里,蛋清顺着漏斗流入容器内 , 而蛋黄则整个留在漏斗里 。
6、鸡蛋上打一个小洞,一倒蛋清就出来了 。也可以买个鸡蛋分离器,好像十块钱左右。
7、用粗针在蛋壳两端各扎一个小孔,蛋清流出来了,蛋焕发在壳内完好无损 。如果不小心蛋壳弄破了 , 可以蛋黄倒进一只杯子里,盛满水,1--2天内,蛋黄任可以保持新鲜不坏 。
8、把鸡蛋轻轻在碗边缘上碰一下,碰出一条裂纹 , 然后在用手将裂纹撕裂至宽度约3-5毫米,在将裂纹向下对准碗口内,用手上下轻轻摇晃3-8次后,就碗内是鸡蛋清,而蛋壳内只余下蛋黄了 。
9、把鸡蛋上打开一个小姆指大的孔,从里面往外倒鸡蛋清就可以了,就可以把蛋黄和蛋清分离了,通常蛋黄是倒不出来的 。
###其它资料参考###蛋黄和蛋清快速分离的方法
1、蛋黄和蛋清快速分离可以用凿口法 。
把鸡蛋竖起来,底部凿一个小口(不能太大,否则蛋黄也会流出来,别忘在鸡蛋下面放个碗之类的器具) 。然后慢慢晃动鸡蛋,蛋清就都流到碗里了 。这个方法比较简易可行,而且不借助其它工具,比较简单 。如果不小心蛋壳弄破了,可以蛋黄倒进一只杯子里,盛满水,1--2天内,蛋黄任可以保持新鲜不坏 。
2、蛋黄和蛋清快速分离可以用瓶吸法 。
准备一个干净的空塑料瓶,然后捏紧瓶身(稍微倾斜)对准蛋黄后松开,蛋黄就进入到了瓶子里面 。吸鸡蛋时要把瓶子倾斜着吸,否则蛋黄又滑落回去了 。尽量把瓶子刷洗干净,蛋黄还要再用 。此方法必须把瓶口对准蛋黄,技术含量大一些,对不准容易把蛋清也吸进去 。

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